菌体蛋白酶的测定用什么试剂盒?对菌体样本有什么要求?
发布时间:2014/2/7 16:55:48 浏览次数:2868 [字号:大 中 小] [关闭此页 打印此页]
我现在做的实验是关于菌体蛋白酶的,现在还不确定其中的蛋白酶是酸性的、碱性的还是中性的,用普通的酶活测定方法测出的吸光值很小,有时候还是负的。
贵公司有没有什么样的试剂盒能方便地测出其中蛋白酶的含量?
希望您能给我点意见或向我推荐一些适合我的公司的产品。
谢谢!
回复:推荐老师用我们公司的A080-1胃蛋白酶测试盒,具体的原理为胃蛋白酶可水解蛋白产生含酚的氨基酸,而酚试剂可被含酚的氨基酸还原成蓝色物质,通过比色可测定胃蛋白酶活力。
胃蛋白酶的底物液为蛋白质,理论上来说不同的蛋白酶在最适PH条件下都具体催化底物液(蛋白质)的能力,由于老师不太清楚其菌体的蛋白酶最适PH(一般我们做菌体测定都是选择中性条件的缓冲液),因此需用不同的PH条件的缓冲液提取菌体的蛋白酶,进行测定,最终选择最适PH进行提取用于批量实验。
由于菌体的活性测定值本来就很低,一般我们要求收集的菌体数量在106以上(推荐5×106),统一加0.5ml的缓冲液进行提取。
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