测蛋清和蛋黄中溶菌酶,,TC,TG和MDA等指标样本怎么处理?
发布时间:2014/2/7 16:57:10 浏览次数:3480 [字号:大 中 小] [关闭此页 打印此页]
要测蛋清和蛋黄中溶菌酶,,TC,TG和MDA等指标。我查到了文献如下。
1、蛋清溶液的溶菌酶测定
蛋清用0.9%氯化钠稀释,乙酸调溶液至pH 4.5,77℃水浴10 rain后取出,静置1 h。离心取上清,按照标准曲线绘制的操作测得OD丝。值,由标准曲线回归方程计算蛋清溶液中溶菌酶的含量(C),再乘以稀释倍数即为蛋清中溶菌酶的含量(P)。
其他的不知道怎么方法测?当时我买试剂盒的时候,说清楚要测鸡蛋的如上指标,但是发过来的试剂盒里面没有详细的说明书,请你尽快吧详细的说明书和方法发给我吧,我现在只等着,尽快吧。谢谢。。。
回复:对于您说的这几个指标,我们都是粗提取后进行测定就可以了,并不需要进行纯化,
因此我们的目的只需要将我们要测的物质提取到液体中便可。
对于TC、TG、MDA的测定,老师可统一用无水乙醇进行提取,如准确吸取蛋黄或蛋清体积1ml,加入4倍体积的无水乙醇(由于无水乙醇易挥发可选择5ml或10ml带盖的EP管中操作),旋涡混匀器上充分混匀(抽提),3500转/分,离心10分钟,取上清进行测定
对于溶菌酶的提取,虽然说溶菌酶在弱酸性条件下活力最好,其次又耐高温,但是我们并不需要如此操作,一般推荐直接用0.1mol/L pH7~7.4磷酸盐缓冲液或生理盐水直接提取便可,如准确吸取蛋黄或蛋清体积1ml,加入4倍体积的缓冲液,旋涡混匀器上充分混匀(抽提),3500转/分,离心10分钟,取上清进行测定
对于TC、TG的测定我之前都做过,但对于MDA、LZM的测定我们之前没有做相关的样本,仅是推荐。
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