瘤胃样品做LDH
发布时间:2014/2/8 9:02:01 浏览次数:2655 [字号:大 中 小] [关闭此页 打印此页]
说明书中的乳酸脱氢酶样品是液体,以ml计算的。我的瘤胃样品是—80度保存的固体,说明书中混匀是均浆法吧,我应用什么规格的匀浆器,多大转速,在多大的管子中混匀,多长时间?另外,苹果酸脱氢酶说明中有个最佳浓度的组织匀浆,这代表什么,我还要测匀浆后浓度吗,如何测?应用什么规格的匀浆器,多大转速,在多大的管子中混匀,多长时间?请您尽快回复,我好按您的指导进行测定。谢谢!还有酶标法48T是什么意思,是一个板子48个空吗
回复:
LDH和MDH测定的样本都需要制备成液体!老师的样本是冷冻保存的固体组织,测定之前需要将其制备匀浆,离心取上清后进行测定!对固体组织匀浆我们用的是组织高速分散器,一般准确称取50-150mg组织,按照重量体积比1:9加入9倍体积的生理盐水,匀浆!说明书操作表中的混匀,是指在漩涡混匀器上使得样本和试剂充分混匀,不是匀浆!
MDH批量检测之前,需要将10%组织匀浆稀释成不同浓度,做预实验,要求就按照说明书上提到的△OD在0.05-0.3之间!选择最佳的匀浆浓度进行批量实验!
当然测定组织中这2个酶活性指标,我们建议同时需要测定匀浆中的总蛋白浓度!
微板法试剂盒,规格上面提到的48T,就是能检测48个样本!
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