红细胞中MDA测定的一些问题?
发布时间:2014/2/8 9:30:39 浏览次数:5224 [字号:大 中 小] [关闭此页 打印此页]
在使用贵公司的MDA测试盒时,遇到了以下问题:
我想测定的是红细胞中MDA含量,采用的是抽提的方法进行的样本前处理。那么使用双蒸水、无水乙醇和三氯甲烷的用量相对红细胞的体积应是多少呢?是否就是按原说明书上对应的全血的倍数呢?抽提离心后,有些管中的上清液表现为红色的浑浊,应该怎么解决呢?如果加NaCl固体,那么其用量为多少呢?另外,我选取了几个离心效果比较好,测定了最吸光度值,大概都在0.027左右,是不是吸光度有点低呢?我水浴时间已经定为80分钟。还有什么方法能够提高吸光度值呢?是把红细胞的用量增加吗?我实验室取了50微升的红细胞。
回复:
MDA测定用提取的方法比较麻烦,一般我们直接用溶血液测定,比较方便!
当然如果要同时测定红细胞中的SOD,可以考虑提取一份,用于不同指标的检测!
用红细胞测定,可以制备成溶血液后再进行提取(如50微升红细胞,加200微升双蒸水制成5倍溶血液,无水乙醇和氯仿的量还是按照2倍来加),如果提取的上清不透亮或者是红色,可以加入一定量的NaCl固体(可以统一每个样本20mg)。您测得的吸光度确实比较低,如果您不需要测定红细胞中的SOD,我还是建议老师直接用溶血液检测MDA!
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