培养细胞测定ATP含量样本前处理？

发布时间：2014/2/8 10:14:50　浏览次数：3742　[字号：大 中 小]　 [关闭此页　打印此页]

我购买了你们的A095ATP含量测试盒，做的对象是培养细胞。说明书上关于细胞匀浆破碎的实验步骤我刚刚咨询你们的技术，技术简单跟我说了几种方法：超声裂解，匀浆碾磨等，还告诉我不要用细胞裂解液。能否将匀浆破碎的具体操作步骤，用到的仪器等详细说明发给我。麻烦了，谢谢！

回复：

1. 先进行细胞常规消化,离心.上层的细胞培养液若不测任何指标可以弃去.或者用小离心管冷冻保存,以备以后测指标用.

2. 离心后的(3500转/分左右)细胞沉淀于离心管底部,然后加生理盐水或0.01M/L,PH=7.4的PBS作为匀浆介质（一般情况下，将细胞稀释至10的6次方或10的7次方）进行超声匀浆或贴壁式匀浆器进行匀浆，千万不可以用SDS破壁（若用之将严重影响酶的活性）。若老师采用贴壁式匀浆器进行匀浆，可从销售部订购玻璃贴壁式匀浆器。

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