成骨诱导测定ALP问题？

发布时间：2014/2/8 10:20:15　浏览次数：4338　[字号：大 中 小]　 [关闭此页　打印此页]

我想咨询几个问题： 

（1）我做成骨诱导测ALP活性，应该是测培养基上清的ALP还是细胞内的ALP？

（2）测细胞内ALP的话如何裂解细胞提蛋白？

（3）是否需要测上清或细胞内总蛋白浓度进行标准化？

回复：

从我们这边接触的样本测定来说，测定细胞中ALP活力相对比培养液中的要好一些；比较细胞代谢方面优于培养液，只有当细胞破碎或者透性增大，才会释放到培养液中。

细胞样本需要进行破碎处理，推荐方法物理破碎，如匀浆、超声等；化学裂解法建议选择相对温和的裂解液；成分不宜过于复杂，防止成分的干扰。

测定细胞中ALP需要尽心蛋白定量；如果是培养液，则不需要进行蛋白定量。

 

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