壁细胞中ATP含量测定的一些问题？

发布时间：2014/2/10 15:37:14　浏览次数：4215　[字号：大 中 小]　 [关闭此页　打印此页]

想要测定贴壁细胞中ATP含量。想和您请教一些问题：

1、说明书中”先离心处理将细胞核培养上清分离“，意思是用胰酶将细胞从贴壁变成悬浮，在离心与培养上清分离吗？但是胰酶会不会对细胞有影响呢？有更好的办法吗？

2、说明书上说，将细胞置于热水浴90-100中匀浆破碎，请问匀浆破碎具体怎么操作呢？

3、混匀抽提后，待测样品应置于哪里？冰上还是室温？

4、一般热水浴和沸水浴如何做到的，目前实验室里没有加热到这么高温度的恒温水浴锅，不知道有没有其他办法？

5、是经过说明书上的样品前处理，之后再进行蛋白浓度的测定吗？gprot/L这个蛋白浓度的单位是怎么定义的？

回复：1、一般的处理方法是用胰酶消化，再离心分离，再用生理盐水洗2-3次，离心留沉淀。

      2、可以用超声细胞破碎仪或者玻璃匀浆管旋转碾磨破碎。

      3、室温

      4、把水煮开用就好

      5、对。gprot/L表示克蛋白/L，即1L样本中有蛋白多少g

 

ALT和AST微板法测定的问题？

还原型谷胱甘肽检测细胞的问题？