BCA测出结果是考马的2倍

发布时间：2014/6/5 8:32:31　浏览次数：6038　[字号：大 中 小]　 [关闭此页　打印此页]

样品为单胞藻，是浮游植物,同样的样品采用不同蛋白定量方法进行测定。结果表明，BCA方法获得的蛋白含量是考马斯亮蓝法得到的两倍，为什么会有两倍差距，问题出在哪里？哪个为准呢？

蛋白质测定的方法有诸多种，目前针对组织样本采用的比较普遍的方法时考马斯亮蓝蛋白定量和BCA蛋白定量居多，但是蛋白测定无论是哪一种方法都会有一定的局限性；考马斯亮蓝通过主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合，进行蛋白定量，非碱性氨基酸部分就会被忽略，如此测定结果有可能测定结果比真实结果偏低；而BCA蛋白定量试剂盒通过测被蛋白质易氧化成分（巯基，酚基）还原的一价铜离子，而间接得出蛋白质量。蛋白质中可能含有其它杂质，且是易氧化成分，则可能BCA测量结果大于真实值。再加之BCA方法灵敏度也偏高，所测结果有可能会比考马斯亮蓝方法测得结果偏高情况。另外就是您测出的OD值过于偏高，高出试剂盒检测限，需要进行稀释后再测定效果会比较好。

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