机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。
产品优点如下:
1、操作简便:可将试剂混合成单试剂操作,全程约50分钟,可测100例左右样本2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放12个月有效,试剂配制后至少能存放6个月;呈色稳定,显色后24小时吸光度不变。
3、再现性好:批内CV=2.3%,批间CV=5.34%。
4、回收试验: X =101.8%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产等,效果均佳。
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为532nm)
2、恒温水浴箱(孵育温度为95℃以上)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
红细胞:需用蒸馏水将红细胞制备成溶血液(100倍溶血液)后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按步骤加入样本和试剂
2、漩涡混匀,95℃以上沸水浴40分钟,流水冷却,然后3500~4000转/分,离心10分钟,取上清待测
3、532nm波长,1cm光径,比色测定各管吸光度值
注:取样量一般为0.1~0.2ml(样本量够直接取0.2ml测定)
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